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冷冻干燥机在蓝耳病病毒标准物质研究中的应用点击次数:139 发布时间:2018-10-08

猪蓝耳病又名猪流行性流产和呼吸综合征,该病病原体为Lelysted病毒,呈卵形、有囊泡、直径在40-60 nm之间,表面有约5 nm大小凸起,基因组为单股正链RNA病毒,该病毒PRRSV基因组具有较强的变异性,传染性强具有地方流行性,我国将其列为二类传染病,在防治该病的过程中首先需要快速诊断和检测蓝耳病病毒,在检测蓝耳病病毒时需要统yi的标准物质。

 

实验设备

冷冻干燥机FDU-1200

冷阱温度-45 ℃

除湿量1 L

采用便捷式设计、可置于实验桌上,操作简单可分别采用手动和自动运行模式,方便科研人员开展大量的实验工作。

 

实验过程

第一步

将灭活后的病毒液制备蓝耳病病毒核酸检测标准物质,将纯化后的病毒进行无菌检测、外源性病毒检测。

 

第二步

将冻干保护剂与蓝耳病病毒液混合摇匀后,移液分装至10支容量为3 mL的具十字橡胶塞的无菌瓶中(十字塞的十字部分插入瓶中,塞冒悬于瓶口),每支1 mL试样。

 

图片3.png

 

 

第三步

10支分装好的试样瓶置于-80 ℃的预冻30 min后取出,预冻后样品瓶置于冷阱温度已达-45 ℃的冻干仓中,运行真空泵开始冻干,一直到样品质量不发生变化时冻干结束并在真空状态下压盖密封十字橡胶塞,得到冻干后的样品。

图片4.png

 

第四步

采用实时荧光定量RT-PCR方法检测蓝耳病病毒标准物质的均匀性、稳定性,得到蓝耳病病毒检测标准物质也为该病毒定性和定量检测提供标准物质。

图片5.png

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